阿普斯特10mg



1.1 作用机理

Apremilast是一种口服小分子磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制环腺苷一磷酸(cAMP)。PDE4抑制导致细胞内cAMP水平升高。对于银屑病关节炎患者和银屑病患者,apremilast发挥其治疗作用的具体机制尚不明确。以下为相关文献信息:

银屑病因为涉及促炎细胞因子IFN-γ、TNF-α,被认为是 Th1 介导的自体免疫性皮肤疾病。阿普斯特是一种小分子磷酸二酯酶 4 ( PDE4)抑制剂,抑制从人类单核细胞 U937 分离的 PDE-4 的半抑制浓度( IC50) 是 74 nmol /L ,PDE4 是一种环磷酸腺苷( cAMP) 特异性 PDE,环一磷酸腺苷(cAMP)是调节炎症反应的关键性第二信使,通过调节促炎和抗炎介质的网络有助于维持稳态,cAMP 受细胞内磷酸二酯酶(PDE)调节,是将 cAMP 降解为 AMP 的唯一方式,因而增加促炎症介质的产生并减少抗炎介质的产生。PDEs 依据氨基酸顺序同源性、对抑制剂敏感性和生物化学性质至少组成了 11 个酶家族。而 PDE4 家族内的每一个酶又以其降解的 cAMP 为靶目标并构成了 4个亚型(PDE4A 到 PDE4D)这些酶位于脑内和免疫活性细胞如中性粒细胞、T 淋巴细胞、巨噬细胞和嗜酸性细胞。在这一群体内,PDE4 家族(4- 基因的酶)在降解炎症细胞以及内皮细胞、平滑肌细胞和角质形成细胞的 cAMP 起着关键的作用。

参考文献:

Schafer PH,Parton A,Gandhi AK,et al.Apremilast,a cAMP phosphodiesterase-4 inhibitor,demonstrates anti-inflammatory activity in vitro and in a model of psoriasis[J].Br J Pharmacol,2010,159( 4) : 842-855

Lowes MA,Bowcock AM,Krueger JG. Pathogenesis and therapy of psoriasis[J].Nature,2007,445(7130):866-873.

1.2 药代动力学

吸收:口服阿普斯特后, 血浆峰浓度达峰时间( Tmax ) 为 2. 5 h, t1 /2 为5 ~ 7 h, 平均口服生物利用度为 70%

分布:人血浆中阿普斯特与蛋白结合率约为68%。平均表观体积(Vd)为87 L。

代谢:口服给药后,apremilast是主要的循环成分(45%),其次是葡萄苷酸与邻甲基化阿普斯特的结合的非活性代谢物M12(39%)。它在人体中广泛代谢,在血浆、尿液和粪便中发现多达23种代谢物。Apremilast是由细胞色素(CYP)氧化代谢和随后的糖脂化和非CYP介导的水解作用共同作用的产物。在体外,apremilast的CYP代谢主要由CYP3A4介导,CYP1A2和CYP2A6的贡献较小。

消除:在健康受试者中,apremilast的血浆清除量约为10 L/hr,最终消除半衰期约为6-9小时。口服放射性标记的阿普利末后,大约58%和39%的放射性分别在尿液和粪便中恢复,大约3%和7%的放射性剂量分别在尿液和粪便中恢复。

特定的人群:

肝损害者,apremilast的药动学不受中度或重度肝损害的影响。

肾损害者,阿普利末的药动学不受轻度或中度肾损害的影响。在8名严重肾功能损害的受试者中,给予30mg apremilast单剂量时,apremilast的AUC和Cmax分别增加了约88%和42%

年龄,研究对象为年轻成年人和老年人,每次口服30毫克的阿普利末。年龄在65岁至85岁之间的老年受试者,与18岁至55岁的年轻受试者相比,AUC和Cmax分别高出约13%和约6%

性别,在健康志愿者的药代动力学研究中,女性的暴露程度比男性高31%左右,Cmax比男性高8%左右。

种族,中日健康男性受试者apremilast药代动力学与高加索健康男性受试者相当。此外,非洲裔白种人、非西班牙裔白种人和非裔美国人的花粉粒暴露情况相似。

1.3 临床研究

1.3.1 临床信息

1.3.2在银屑病关节炎患者中临床研究

在3项相似设计的多中心,随机,双盲,安慰剂-对照试验(研究PsA-1,PsA-2和PsA-3)中评价Otezla的安全性和疗效。总共1493例有活动性银屑病关节炎[PsA]成年患者(≥ 3个肿胀关节和≥3个触痛关节)尽管以前或当前用疾病修饰抗风湿药物(DMARD)治疗被随机化。纳入这些研究的患者有PsA诊断至少6个月。研究PsA-3中要求一个合格的银屑病皮肤病变至少2 cm直径。以前治疗允许使用一种生物制品,包括肿瘤坏死因子[TNF]-阻断剂(至可能是10%TNF阻断剂治疗失败)。跨越3项研究患者被随机赋予安慰剂(n=496),Otezla 20 mg(n=500)或Otezla 30 mg(n=497)口服给予每天2次。在头5天使用点滴调整[见剂量和给药方法(2.1)]。试验期间患者被允许接受稳定剂量的同时氨甲喋呤[MTX (≤ 25 mg/周)],柳氮磺吡啶[sulfasalazine,SSZ(≤ 2 g/day)],来氟米特[leflunomide,LEF(≤ 20 mg/day)],低剂量口服皮质激素(等同于≤ 10 mg 泼尼松[prednisone]一天),和/或非甾体抗炎药(NSAIDs)。在研究PsA-1,PsA-2和PsA-3中根据在基线时使用的小分子DMARD治疗赋予被分层。在PsA-3研究中还有银屑病3 %体表面积BSA另外分层。排除对PsA (小分子或生物制品) 3个药物,或 1个生物制品TNF阻断剂治疗失败的患者。

主要终点是在第16周实现美国风湿病协会(ACR)20反应患者的百分率。安慰剂-对照疗效数据被收集和分析至第24周。在第16周时患者触痛和肿胀关节计数的改善没有至少20%被考虑为非反应者。安慰剂组的非反应者点滴调整时间表后被再次被盲态以1:1随机化至Otezla 20 mg每天2次或30 mg每天2次[见剂量和给药方法(2.1)]。Otezla患者维持其初始治疗。在第24周时,所有其余安慰剂患者被再次随机化至Otezla 20 mg每天2次或30 mg每天2次。

跨越三项研究纳入有PsA亚型的患者,包括对称多关节炎[symmetric polyarthritis](62.0%),不对称寡关节炎[asymmetric oligoarthritis](27.0%),远端指间关节(DIP distal interphalangeal joint)关节炎(6.0%),破坏性关节炎[arthritis mutilans](3.0%),和主要脊柱炎[predominant spondylitis](2.1%)。银屑病关节炎PsA疾病中位时间为5年。患者接受同时治疗有至少一种DMARD (65.0%),MTX (55.0%),SSZ (9.0%),LEF (7.0%),低剂量口服皮质激素(14.0%),和NSAIDs(71.0%)。76.0%患者报道以前只用小分子DMARDs和22.0%患者报道以前用生物制品DMARDs治疗,其中报道9.0%患者以前生物制品DMARD治疗失败。

银屑病关节炎患者的临床反应 :在下面表3中展示在研究PsA-1,PsA-2,和PsA-3中实现ACR 20,50 和70反应患者的百分率。OTEZLA ± DMARDs,与安慰剂 ± DMARDs比较导致银屑病关节炎体征和症状更大改善如 通过在第16周时有ACR 20反应患者比例证实。

研究PsA-1中OTEZLA 30 mg每天2次导致在第16周时与安慰剂比较各ACR组分改善(表4)。在研究PsA-2和PsA-3观察到一致结果。

用OTEZLA治疗导致在有预先存在指炎或附着点炎患者中指炎和附着点炎改善。

部分临床试验文件:

https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/nda/2014/205437Orig1s000ClinPharmR.pdf

二、上市情况

2.1 apremilast全球上市信息

2014年3月21日,FDA批准apremilast用于治疗中度至重度牛皮癣(又称斑块型银屑病或plaque psoriasis),剂型为片剂,规格为10mg,20mg,30mg。

2013年9月13日,EMA批准apremilast用于贝塞特病(f Behçet’s)的治疗;2015年2月16日,再批准其单独或联合疾病改良抗风湿性关节炎药物(DMARDs),用于治疗成人患者的活动性银屑病关节炎(PsA)。剂型为片剂,规格为10mg,20mg,30mg。

2016年12月19日,PMDA批准apremilast用于斑块型银屑病和银屑病关节炎的治疗,剂型为片剂,规格为10mg,20mg,30mg。

2.2apremilast全球注册信息

2.2.1 API生产厂家分析

Apremilast在国外有较多生产厂家批准,总共有20家企业生产该药,取得美国FDA批件的有12家,在这12家企业中有印度占7家,我国大陆只有华海药业,台湾地区只有台湾神隆,其他3家属于欧洲企业,分别是波兰,斯洛文尼亚,西班牙,各1家。另外,我国还有一些暂未取得FDA批件,但又有生产能力的企业家,分别是华邦制药,杭州朗耀生物技术,皓元医药。

2.2.2FDA注册信息

2.2.2.1产品信息

2.2.2.2批准历史,通知信,综述等审批信息

2.2.2.3与本品相关的专利信息

2.2.3 HMA注册信息

Product Name in the RMS:Aprepitant Teva 125mg/80 mg, hard capsules

MR Number:NL/H/3854/003

Date of outcome:31.05.2018

Product Name in the RMS:Aprepitant Sandoz

MR Number:HU/H/0498/003

Date of outcome:04.12.2017

三、apremilast专利和合成工艺分析

3.1 apremilast专利分析

3.1.1化合物专利

文献US6020358在文中第一次提到最早没有手性的apremilast,并有其合成方法。该文献保护了如下通式化合物,并在权利要求里列出了没有手性的apremilast。

2003年3月19日,Celgene在专利US2003187052中公开了apremilast及合成方法,该专利在2005年11月8日获得授权,授权号为US6962940 (B2),该专利在各个国家申请了其同族专利。该化合物专利的保护期即将到期(US6020358,申请日1998年10月30 日,已经授权,失效期2018年10月29日;US2003187052失效期2023年3月18日),US6020358同族中国专利为CN1652772、CN1965823、CN101683334相关法律状态见:“2.1.3apremilast原研制剂专利分析”。

3.1.2apremilast晶型专利分析

2008年3月27日,Celgene首先保护了apremilast晶型B,在其专利US7893101中提及晶型A/B/C/D/E/F/G/H。该专利已经获得授权,2018年8月22日仍有继续付费。该专利的同族中国专利为CN1652772、CN1965823、CN101683334相关法律状态见:“2.1.3apremilast原研制剂专利分析”

其后,有众多的公司研究了该药物的晶型及制备方法,而在相关网站中,提交美国DMF文件里的晶型主要为晶型B、晶型M和无定型3种晶型。在相关的销售信息中,其晶型主要为晶型M。在我国,除了杭州新博思生物医药,没有其他公开的专利研究晶型B、晶型M的制备方法,多数为研究无定型晶型的专利。

3.1.3apremilast原研制剂专利分析

CN1652772分析

申请人Celgene,申请日2003年3月20日。该专利保护了一种药用组合物,用于哺乳动物实验。该组合物中包含apremilast,或其药学可接受的多晶型物、前药、盐、溶剂合物、水合物或笼状包合物,以及药用可接受的载体、赋形剂或稀释剂。该组合物给药途径为口服,用量为10-200mg,剂型为胶囊、片剂或喷雾剂,治疗疾病为哮喘、过敏性鼻炎、炎症或慢性肺炎。

该专利2005年8月10日公开,同年10月5日进入实审,于2008年10月22日获得授权。

CN1965823分析

申请人Celgene,申请日2003年3月20日。该专利保护了一种药用组合物。该组合物中包含apremilast,或其药学可接受的多晶型物、前药、盐、溶剂合物。该组合物给药途径为口服,用量为10-200mg,剂型为胶囊、片剂,治疗疾病为抑郁症、皮炎、银屑病、特异性皮炎、接触性皮炎、类风湿性皮炎、骨关节炎、系统性红斑狼疮、肠炎、节段性回肠炎、白塞病或结肠炎。公布了100mg和200mg胶囊的处方及制备工艺。

该专利公开时间为2007年5月23日, 2007年7月18日进入实审,2010年5月12日获得授权,2010年12月10日在香港获得标准专利。

CN105050624

申请人Celgene,申请日2014年3月13日。该专利保护了一种治疗银屑病关节炎的方法。

所述方法包括患有银屑病关节炎的患者口服递增剂量的apremilast,或其药用前药、多晶型物、盐、溶剂合物。起始剂量为10mg/天至20mg/天,以及最大剂量为40mg/天至100mg/天,详细列出了给药方法。该方法还需要一种或多种第二活性剂:非甾体抗炎剂、抗风湿剂。

3.2apremilast合成工艺分析

3.2.1原研合成工艺

Celgene研发了5条合成路线,分别如下:

路线一

US6020358---该专利是最早申请的专利,申请日1998年10月30日,目前仍为有效专利,但即将到期。

该专利保护了以下通式化合物,并未保护制备具体化合物的方法。且专利即将到期,按照该文献合成没有手性型的apremilast不存在侵权的问题。

该专利采用3-乙氧基-4-甲氧基苯甲醛为起始原料,经过取代、还原、缩合3步合成了没有手型的apremilast。该路线较短,第三步的原料较难获得,要用到危险的正丁基锂,且产物没有手型,需要拆分,缺点较多。

路线二

WO2003080049---该专利申请日为2003年3月20日,目前已在全球多个国家获得批准,其同族中国专利为CN100427085 (C)、CN1965823 (B)、CN101683334 (A)。

该专利保护了第二步3-乙氧基-4-甲氧基-[(甲基磺酰基)甲基]-苯甲胺拆分方法,其他步骤没有保护,也没有保护各中间体。避开该专利的保护难度较大。

该专利采用3-乙氧基-4-甲氧基苯甲醛为起始原料,经过取代、还原得中间体,然后用手型拆分剂进行拆分,再与3-乙酰氨基邻苯二甲酸酐缩合,得到apremilast。该路线相对于合成路线一,有很大的进步,但还是由于使用到危险的正丁基锂,缺点较明显。

路线三

US2003187052----该专利申请日为2003年3月19日,于2005年11月8日获得授权,授权号为US6962940 (B2),其同族中国专利为CN100427085 (C)、CN1965823 (B)、CN101683334 (A)。

该专利保护了第二步拆分方法及3-乙氧基-4-甲氧基-α-[(甲基磺酰基)甲基]-苯甲胺N-乙酰基-L-亮氨酸盐,其他步骤和中间体没有保护,避开该专利的保护难度较大。

该路线3-硝基邻苯二甲酸为起始原料,先还原硝基,再缩合,得到3-乙酰氨基邻苯二甲酸酐,然后与手型3-乙氧基-4-甲氧基-α-[(甲基磺酰基)甲基]-苯甲胺合成了apremilast。该路线起始原料容易获得,没有使用危险试剂,但3-乙氧基-4-甲氧基-[(甲基磺酰基)甲基]-苯甲胺较难获得,需要解决该问题。

路线四

US2013217918----该专利申请日为2013年2月20日,于2015年11月17日获得授权,授权号为US9187417 (B2),其同族中国专利为CN104245668 (B)、CN107033042 (A)。

该专利保护以下通式,

以及上图所示合成该化合物的方法,且保护了另外中间体

突破专利的保护难度较大。

3-乙氧基-4-甲氧基苯腈经过取代、水解、加成、还原等一系列反应得到但3-乙氧基-4-甲氧基-[(甲基磺酰基)甲基]-苯甲胺,再与经过另1条路线合成的侧链与3-乙酰氨基邻苯二甲酸酐缩合,得到apremilast,该路线较长,且使用了危险的正丁基锂,工业生产难度较大。

路线五

US20140081032----申请日为2013年12月13日,于2015年3月17日获得授权,授权

号为US8981117 (B2),目前没有同族中国专利。

该专利保护如路线所示制备apremilast的方法,由于没有列出具体制备条件,能否获得中国授权专利存在着较大不确定因素。

该路线缺点仍是危险的正丁基锂,工业生产难度较大。

3.2.2其他公司合成工艺

路线六

WO2017046319----申请人LEK PHARMACEUTICALS, 申请日2016年9月16日。目前无同族中国专利。

该专利保护如路线所示制备apremilast的方法,且保护以下中间体:

突破该专利保护的可能性极低。

该专利以3-乙氧基-4-甲氧基苯乙酮为起始原料,经过溴化、硫化、还原、叠氮化、还原、缩合,或经过溴化、还原、硫化、叠氮化、还原、缩合等反应得到apremilast,该路线太长,且使用到了高度危险物叠氮化氢,工业生产安全风险较大。

路线七

WO2017179065----申请人DAVULURI RAMAMOHAN,申请日2017年1月27日。目前无同族中国专利。

该专利保护如路线所示合成apremilast的方法,以及如下所示化合物的合成方法,

并保护如下化合物的晶型:

该专利的保护突破难度较大。

关键中间体3-乙氧基-4-甲氧基-α-[(甲基磺酰基)甲基]-苯甲胺的新方法,但仍和Celgene一样使用了危险物正丁基锂,工业生产时安全风险太大。

路线八

WO2017059040-----申请人PLIVA HRVATSKA和TEVA,申请日2016年9月29日。目前无同族中国专利。

该专利保护如路线所示合成apremilast的方法,以及多个中间体的制备方法,并未保护各中间体化合物,理论上有避开专利保护的可能性,可作为重点研究路线。

该路线以3,4-二甲氧基苯乙酮为起始原料,经醚化、溴化、硫醚化、拆分、再氧化、缩合,或再缩合、氧化,最终得到apremilast。该路线虽然较长,但没有危险反应,且原料易得,是条较好的路线。

路线九

WO2012083153----申请人NEKTAR THERAPEUTIC,申请日2011年12月16日,目前无同族中国专利。

该专利没有保护如路线所示合成apremilast的方法或各中间体。

该路线以3-乙氧基-4-甲氧基苯甲醛为起始原料,经盐酸羟胺缩合、还原、取代、还原、缩合、还原、乙酰化等反应,得到apremilast。该路线使用了危险物正丁基锂,工业生产时安全风险太大。

路线十

CN103864670----申请人苏州明锐医药科技有限公司,申请日2014年3月17日,已经于2015年8月26日获得授权,授权号为CN103864670 (B)。

该专利保护如图所示制备apremilast的方法,理论上存在突破专利保护的可能性。

该路线缺点明显:使用了危险的正丁基锂,且第一步反应原料

(R) 1-(Amino-phenyl-methyl)-naphthalen-2-ol很难获得,无法工业化生产。

四、apremilast检测方法

参考资料:WO2016169533

参考资料:WO2016169533

色谱条件

色谱柱Agilent Zorbax SBC18(4.6*250mm,5um),流动相:甲醇:20mmol/l磷酸二氢铵PH3.0=54/46(V/V),流速1.0ml/min,检测波长220nm,进样量20ul,柱温30℃。

参考文献:HPLC法测定阿普司特原料药的含量

Related substances by HPLC Shimadzu HPLC system LC-2010 CHT with UV detector with LC solutions software or its equivalent was used. The analysis was carried out on Cosmosil C-18 column 250 mm x 4.6 mm, 5.0 μm with Guard cartridge: Make; Phenomenex C18, 4.0 mm x 3.0 mm ID. Column temperature is 35⁰C and auto sampler temperature 5⁰C. Separation was achieved with the mixture of mobile phase-A and mobile phase-B in gradient elution with timed programme Tmin/A:B: T0/98:02; T20/98:02; T30/60:40; T40/50:50; T50/40:60; T60/25:75; T62/98:02; T70/98:02. The flow rate was 1.0 mL/min and sample injection volume was 15 μL. Detector wavelength is 230 nm. Diluent: Acetonitrile: Water (25:75 v/v) Buffer-1: preparation (for Mobile phase) Add 1.0 mL of Trifluoroacetic acid in 2000 mL of HPLC grade water. Buffer-2: (for KRM-B solution preparation) Weigh accurately about 1.36 gm of potasium dihydrogen phosphate in 1000 mL of water.Adjust pH of the solution to 3.0 ± 0.05 with dilute orthophosphoric acid. Mobile Phase-A: Buffer-1: Methanol (90:10) v/v Mobile Phase-B: Buffer-1: Acetonitrile (10:90)

参考文献:STABILITY-INDICATING RELATED SUBSTANCES METHOD OF APREMILAST BY HPLC AND SYNTHESIS AND CHRACTERIZATION OF RELATED IMPURITIES USING MASS AND NMR SPECTROSCOPY

Instrumentation and Chromatographic Conditions HPLC (Agilent 1200, Agilent Technologies, Germany) equipped with photodiode array detector was used for method development, forced degradation studies and method validation. The photodiode array detector was used to determine the peak purity of stressed samples. Synergi Max-RP 80 A (150 × 4.6 mm ID), 4 µ HPLC column thermostated at 40˚C was used for the separation. Mobile phase A was prepared by dissolving 5.75 ± 0.10 g ammonium dihydrogen orthophosphate and 1 ml triethylamine in 1000 mL of Water, filtered through 0.45 µm membrane filter (0.45 µ, Millipore) and degassed in ultrasonic bath prior to use. Acetonitrile was used as mobile phase B. The flow rate and injection volumes were 1.0 mL∙min−1 and 10 µl respectively and auto sampler temperature was kept at 5˚C. The analysis was carried out under gradient conditions such as: time (min)/A (v/v): B (v/v); T0.01/70:30, T3.0/70:30, T18.0/45:55, T24.0/45:55, T26.0/70:30 and T30.0/70:30. The data was acquired at 230 nm for 30 min and processed by using EZ Chrom Elite software Ver. 3.2.1.

参考文献:Development and Validation of Stability Indicating Rapid RP-LC Method for Determination of Process and Degradation Related Impurities of Apremilast, an Anti-Inflammatory Drug

High performance liquid chromatography (HPLC) and Pre-HPLC Chromatographic studies were performed on Agilent 1100 HPLC system (Agilent Technologies, USA). The chromatograms were recorded and analyzed employing Agilent Chemstation chromatographic workstation.The HPLC was performed on a Wondersil C18(250mm×4.6mm, 5µm). The column was held at 30 ℃. The mobile phase A was 0.03% TFA in the water, while the mobile phase B was ACN (0.03% TFA). The gradient program was as follow: Time (min)/A:B (v/v); T0 95/5, T40 30/70, T45 30/70, T50 95/5, T60 95/5. The elution flow rate was 1.0mL/min, and the detection wavelength was set at 230nm.

参考文献:Identification, characterization and HPLC quantification for impurities of Apremilast

五 市场信息

下一篇:阿普斯特30mg-原研药